PCR analízise átiratban, mivel figyelembe a férfiak és a nők
Erősen informatív PCR módszerrel (polimeráz láncreakció) lehetővé teszi a korai kimutatására különböző genetikai és fertőző betegségek előforduló akut vagy krónikusan. És lehet azonosítani, még abban a szakaszban, amikor nem bármely tünetét mutató magukat. Leggyakrabban igénybe PCR analízis kimutatására szexuális úton terjedő betegségek (STD-k, STI).
Mi PCR analízist
PCR analízis tárgya a molekuláris diagnosztikai módszerek, amelynek alapja a többszörös növekedést az alacsony koncentrációban alkalmazott specifikus nukleinsav-fragmensek (DNS) a kórokozó bármilyen biológiai anyagok (vér keneteken a méhnyak, a hüvely, a húgycső, a vér, nyál, köpet és hasonlók. D.) és összehasonlítása annak DNS vagy RNS egy adatbázis ismert adatok típusú fertőzések.
Előnyei PCR diagnosztika más eljárásokkal szemben
PCR technikát már széles körben használják a modern orvostudomány miatt számos vitathatatlan előnye. Azt fogja mondani, hogy róluk részletesebben.
Az a képesség, hogy közvetlenül jelenlétének kimutatására a kórokozó
Sokan a hagyományos képalkotó módszerek meghatározásán alapul markerek - fehérjék, amelyek a termékek alapvető tevékenysége a kórokozót. Az ilyen diagnosztikai elv csak adni közvetett bizonyítéka patológia. PCR módszer egy közvetlen meghatározását a kórokozó, hiszen azonosítja specifikus régióinak DNS patogén organizmusok.
magas specificitás
PCR módszer különbözik, mert nagy specifitással, amely lehetővé teszi, hogy kimutatására DNS-fragmensek, amelyek specifikusak egy adott fertőző ágens. Amikor immunológiai módszerekkel a valószínűsége megszerzésének hamis eredményt (hiba a diagnózis kapcsolatos keresztreaktív antigénekkel). PCR-re vonatkozóan, a hibák tulajdonságai, mivel a specificitás ebben az esetben adott nukleotidszekvencia által a primerek.
nagy érzékenységű
Ezzel a módszerrel akár az egyes kórokozók kerülnek meghatározásra. Kórokozók észlelnek az emberi test még akkor is, ha más diagnosztikai módszerek nem tisztázza a helyzetet (beszélünk különböző immunológiai mikroszkópos és bakteriológiai kutatási módszerek).
Íme az adatok összehasonlítását. Érzékenység-mikroszkópiás és immunológiai módszerek 103-105 sejtek, és a PCR - 10-100 sejteket a mintában.
általános módszerek
A PCR-technika alapján a tanulmány a DNS-patogén organizmusok. A tanulmány meghatározta a DNS-t vagy RNS-fragmensek, amelyek specifikusak az adott patogének. Mivel minden nukleinsavak van egy hasonló kémiai összetételű, laboratóriumi elemzéssel módszereket lehet alkalmazni egységes. Ez azt jelenti, hogy a vizsgálat során a minta lehetővé teszi, hogy észlelni több kórokozókat.
gyors eredmények
Ez a technika nem igényel a növénytermesztés kórokozók, amelyek figyelembe sok időt. Keresztül a szabványosított anyag feldolgozási technológia és a kimutatási reakció termékek, valamint egy automatizált folyamat minden sokszorozóeljárásból tanulmány néhány órát vesz igénybe.
Képes felismerni fertőzés látens formában
A PCR technika lehetővé teszi, hogy hatékonyan ellátni preklinikai diagnosztika (detektálás kórokozók előtt a tünetek) és retrospektív diagnózis (azonosító kórokozók elvégzése után betegség). Így preklinikai diagnózis nagyon fontos vizsgálata során a beteg a lappangási idő a betegség lehetséges - miután a feltételezett fertőzés a kezdete az első tünetek.
Az egyik fontos előnye, hogy képesek a PCR elemezni biológiai maradványok vagy levéltári anyagok. Ez lehetővé teszi, hogy azonosítsa a apasági és identitás.
A módszer a PCR
Ennek az alapja a diagnosztizálási módszer megismételjük megduplázása részének RNS vagy DNS. Ez a folyamat kerül végrehajtásra a laboratóriumban specifikus enzimek. Ennek eredményeként, kialakítva DNS-régiók (RNS) a szükséges vizuális vizsgálat. Az eljárás során csak a másolt része, amely megfelel határozni azokat a feltételeket (ha az jelen van a vizsgált mintában).
A következő lépés a diagnózis eredményeit elemezzük és összehasonlítjuk egy adatbázisban fertőzések.
PCR technikával nem csak lehetővé teszi, hogy meghatározza, hogy milyen típusú kórokozó, hanem lehetővé teszi, hogy következtetéseket vonjunk le a számát kórokozók az emberi szervezetben.
Ma az ilyen technológia nagyszerű lehetőségeket mutációk tanulmány splicing DNS szakaszokat. A modern orvostudomány, a módszer kezdett meghatározásához használt apasági, azonosítani az új gének és így tovább.
Miatt a sokoldalúság PCR módszert széles körben használják urológia, nőgyógyászat, pulmonológia, onkológia, hematológia, tuberkulózis, fertőző betegség gyakorlat és az orvostudomány egyéb területein.
Az anyag a PCR-analízis
PCR diagnosztikai alkalmazni a különböző folyékony biológiai közegben vett az emberi test: köpet, nyálka, nyál, vizelet, vér, kaparás hámsejtek, placenta szövetek, pleurális folyadék, magzatvíz, prosztata gyümölcslé és mások.
A diagnózis a szexuális úton terjedő betegségek (STD-k) kerülnek elemzésre kisülési a hím és női nemi szervek. Ehhez hajtsa végre a kenet vagy kaparja a húgycső vagy a méhnyak. Azt is használják a tanulmány a vizelettel.
Annak érdekében, hogy azonosítani fertőzések (herpesz, mononukleózis, citomegalovírus, toxoplasmosis, HIV, hepatitis B és C) az elemzés során a vért veszünk. A gyanús elváltozások az idegrendszer termel kerítés agy-gerincvelői folyadék.
A pulmonális kutatás segítségével mellűri folyadék és váladék.
Detektálásához méhen belüli fertőzések méhlepény szöveti analízisnek vetettük alá, és a magzatvíz.
PCR szexuális úton terjedő betegségek és egyéb fertőzések
Milyen fertőzés lehet kimutatni PCR-analízissel
- HIV-fertőzés (lehet azonosítani immundeficiencia vírus HIV-1).
- A vírusos hepatitis A, B, C, G (RNS-HAV, DNS-HBV, RNS-HCV, az RNS-HGV).
- STIs (szexuális úton terjedő fertőzések) - ureaplasmosis, bakteriális hüvelygyulladás, chlamydia, mycoplasmosis, trichomoniasis.
- Fertőző mononukleózis (Epstein-DNS Barr -VEB).
- A citomegalovírus (DNS-CMV).
- Herpeszes fertőzések (herpes simplex vírus-DNS a HSV 1 és 2 típusú).
- Tuberkulózis (Mycobacterium tuberculosis).
- Onkogén vírusok - vírusfertőzés (humán papilloma vírus (beleértve annak onkogén típusaival 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, és 59).
- Lyme-kór, kullancs-encephalitis.
- Candidiasis (gombák a Candida nemzetség).
- Helicobacter pylori fertőzés (Helicobacter pylori)
és mások.
Elkészítése és benyújtása PCR
A betegek, akik letették anyag diagnosztikai PCR támaszkodnak megszerzése gyors és pontos eredményt. Tehát szükség van, hogy vegye figyelembe egy fontos pont - a diagnózis pontosságának a nem csak attól függ a szakmai és képességeit az orvosi laboratóriumban. Annak vizsgálata tanulságos volt, akkor arra kell törekedniük, és maga a beteg. Tehát, ha szigorúan be kell tartaniuk az összes ajánlásait az orvos, és kövesse a szabályokat előkészítése a gyűjtemény anyaga. Fontos, hogy ne következzen be szennyeződés biológiai mintákat, különben a felmérés eredményei ferde lesz.
Előállítása a PCR-analízis
Felkészülés az eljárás nem kapcsolódik speciális kihívásokat. Elég emlékezni néhány szabályt:
- Blood PCR-analízis kell éhgyomri. A vért vénájából általában reggel steril tűt egy speciális gyűjtőedénybe.
- Nap során a bevétele előtt bemutatott anyagot absztinencia rögzítés alatt a PCR kenet STI.
- Vizelet PCR veszi az első rész, a tartály sterilnek kell lenniük.
Hogyan kell szedni az elemzés PCR férfiaknál és nőknél
PCR analízis veszünk a férfiak és a nők a vakcinázási szobában, vér volt egy véna, nyál tamponokat a torok, a mandulák, nazális tamponokat a, stb mintavételi eljárás nem különbözik.
PCR STI ülni a terhesgondozóval egy nőgyógyászati vizsgálat a nők hüvelyi tamponokat a méhnyak, a húgycső. A férfiak egy látogatás során andrologist vagy nemi betegségek szakorvosa egy kenet a húgycsövet.
Reakcióvázlat kerítés anyag PCR
Reakcióvázlat kerítés anyag az orr PCR
Reakcióvázlat kerítés anyag PCR mandulák
Reakcióvázlat kerítés anyag PCR kötőhártya
Reakcióvázlat kerítés anyagot PCR a szájnyálkahártyán
Reakcióvázlat kerítés anyag PCR nőknél
Reakcióvázlat kerítés anyag PCR férfiaknál
Meddig PCR
A betegek nem kell sokáig várni a PCR felmérés eredményeit. Az egész elemzési eljárás jellemzően néhány óra (real time PCR), hogy 2-10 napig. Általános szabály, hogy az eredményeket a kezében a beteg megkapja 2-5 nap, maximum 10 nap, ez attól függ, hogy milyen típusú elemzést. PCR diagnosztika a leghosszabb vérben a HIV és a hepatitis, és legalább minden tamponok és scrapings - 2-3 nap.
Transzkripciós PCR elemzés
A negatív eredmény azt jelzi, hogy ezen a ponton a biológiai anyag már nem mutatható ki nyomokban kórokozók. Azaz fertőzés, amely körül a felmérést, nem.
A pozitív eredmény azt jelzi, az észlelési nyomait a kórokozó biológiai mintában. Ez azt jelenti, hogy ebben az időben a fertőzés van jelen az emberi szervezetben.
Előfordulhatnak olyan esetek, amikor a PCR pozitív eredményt, de aktív fertőzés volt megfigyelhető. Beszélünk egy olyan jelenség, hogy az úgynevezett „egészséges hordozó”. így a beteg nem igényel kezelést, de legyen állandó dinamikus megfigyelés. Az ilyen helyzetek jellemző virális fertőzések: Epstein-Barr-vírus (EBV), ginitalny herpesz, citomegalovírus (CMV), a humán papillóma vírus (HPV), amelyben tanulni mintát kell venni a helyi kamrák (kaparás a húgycső, a méhnyak, a nyál). Ugyanakkor nem szabad elfelejteni, hogy az egészséges hordozók át a fertőzést másoknak. Továbbá, nem zárja ki az aktiválás a fertőzési folyamat. Abban az esetben, ha a PCR pozitív eredményt ad a vérvizsgálattal, ez nem tekinthető kocsi. Az ilyen betegek szükség egy speciális kezelés a betegség által okozott kórokozó kimutatható.
A mennyiségi mutatók nem gyakori árnyalatokkal. Az orvos értékeli külön minden egyes fertőzés. Mennyiségi eredmények lehetővé teszi, hogy meghatározza, milyen aktív fertőzés és azonosítsa a műveletben.
A megbízhatóság a PCR módszerrel
Ahhoz, hogy értékeljék a módszer, három feltétel:
- Pontosság - történő fertőzés észlelése (vagy annak hiánya) nagy valószínűséggel.
- Sajátosságai - pontosságának meghatározása egy adott kórokozó.
- Érzékenység - a képesség, hogy a kórokozó akkor is, ha kis mennyiségű genetikai anyag egy biológiai mintában.
Amikor a PCR-módszert, hogy megkapják a hamis pozitív eredmények gyakorlatilag lehetetlen (azaz, ha a kórokozó nincs jelen, akkor a pozitív minta nem fog).
Álnegatív eredmény lehetséges, de ez ritkán fordul elő. Ilyen helyzet áll elő, ha a fertőzés idején a tanulmány inaktív. Például, a krónikus fertőzés aktív vagy látens fertőzést.